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Placas prontas para a contagem de coliformes em alimentos, bebidas e água engarrafada, sem preparo de meio de cultura nem de placas de ágar. Cada placa é um sistema de meio de cultura pronto para a amostra, com nutrientes modificados de Vermelho Violeta Bile (VRB), agente gelificante solúvel em água fria e indicador tetrazólio, que facilita a contagem das colônias.
Basta aplicar 1 mL da amostra no centro do filme inferior, baixar o filme superior e distribuir com o difusor: o gel se forma em pelo menos um minuto. O resultado é quantitativo, com leitura em 24 horas ± 2 horas, e o método tem validações AOAC (986.33, 989.10 e 991.14), AOAC PTM e NF Validation da AFNOR. A caixa traz 50 placas.
Os coliformes que crescem na placa produzem ácido, que faz o indicador de pH escurecer a cor do gel, e o gás que fica preso ao redor das colônias vermelhas indica coliformes. A contagem pode ser feita em um contador de colônias comum ou em outro amplificador iluminado.
A leitura muda conforme o método de referência adotado pelo laboratório:
As placas são incubadas na horizontal, com o lado transparente para cima, em pilhas de até 20 placas. A temperatura depende do método de referência:
A área circular de crescimento tem aproximadamente 20 cm², com fundo quadriculado. O limite recomendado de contagem é de menos de 150 colônias; acima disso, conte as colônias em um ou mais quadrados representativos, calcule a média por quadrado e multiplique por 20 para estimar a contagem da placa.
Com concentrações muito altas de coliformes, a área de crescimento fica vermelho-escura, com muitas colônias pequenas e muitas bolhas de gás: registre como muito numerosas para contar e repita com uma diluição maior. Não conte colônias sobre a barreira de espuma, que estão fora da influência seletiva do meio, nem bolhas artificiais sem colônia.
Use diluentes estéreis adequados, como água de diluição tamponada de fosfato de Butterfield, água peptonada a 0,1%, diluente de sal peptonado, água peptonada tamponada, solução salina (0,85 a 0,90%), caldo Letheen sem bissulfito ou água destilada. Não use diluentes com citrato, bissulfito ou tiossulfato, que podem inibir o crescimento.
Homogeneíze a amostra e ajuste o pH da suspensão para 6,6 a 7,2: com NaOH 1N em produtos ácidos e com HCl 1N em produtos alcalinos.
Para água engarrafada, a placa é primeiro hidratada com 1 mL de água destilada, desionizada ou de osmose reversa estéril e fica fechada por no mínimo 1 hora. As placas hidratadas podem ser guardadas em saco plástico fechado, protegidas da luz e refrigeradas entre 2 e 8 °C por até 7 dias.
A amostra é filtrada em membrana de éster de celulose mista de 47 mm e poros de 0,45 µm, o filtro é colocado no centro da área hidratada e a placa é incubada. Nessa aplicação, contam-se como coliformes as colônias vermelhas associadas a bolhas de gás.
Documentos: Manual do produto (PDF)
| Característica | Especificação |
|---|---|
| Tipo | Placa pronta (filme reidratável) para contagem de coliformes |
| Meio | Nutrientes modificados de Vermelho Violeta Bile (VRB), agente gelificante solúvel em água fria e indicador tetrazólio |
| Resultado | Quantitativo (contagem de colônias) |
| Volume de inóculo | 1 mL |
| Área de crescimento | aproximadamente 20 cm² |
| Limite recomendado de contagem | menos de 150 colônias por placa |
| Tempo de resultado | 24 horas ± 2 horas |
| Incubação | 30, 32, 35, 36, 37 ou 44 °C ± 1 °C, conforme o método de referência |
| Validações | AOAC Official Methods 986.33, 989.10 e 991.14; AOAC PTM nº 082101; NF Validation (AFNOR); Health Canada MFHPB-41 |
| Armazenamento (embalagem fechada) | refrigerada ou congelada, a 8 °C ou menos |
| Embalagem aberta | fechada com fita adesiva, em local fresco e seco, por até quatro semanas |
| Apresentação | caixa com 50 placas |
A contagem de coliformes é um dos indicadores mais usados no controle higiênico de alimentos e bebidas. Com a placa pronta, o laboratório elimina o preparo de meio e de placas de ágar: aplica 1 mL da amostra, incuba em pilhas de até 20 placas e conta as colônias vermelhas em 24 horas ± 2 horas, com validações AOAC e AFNOR.
Sim. Incubada por 24 horas ± 2 horas a 44 °C ± 1 °C, a contagem de todas as colônias vermelhas equivale à enumeração pela NF V08-060.
Conte as colônias em um ou mais quadrados representativos, calcule a média por quadrado e multiplique por 20, que corresponde à área de aproximadamente 20 cm². Para uma contagem mais exata, dilua mais a amostra.
Embalagens fechadas ficam refrigeradas ou congeladas a 8 °C ou menos. Depois de aberta, a embalagem é fechada com fita adesiva e guardada em local fresco e seco por até quatro semanas, sem voltar à geladeira.
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