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Meio de enriquecimento desidratado recomendado para a detecção e a enumeração de Listeria em amostras de alimentos e do ambiente. É usado no enriquecimento seletivo de Listeria monocytogenes e de outras espécies de Listeria em todos os tipos de alimentos, incluindo leite e laticínios, e a fórmula adere à ISO 11290.
É uma modificação do caldo Fraser base, com as concentrações de ácido nalidíxico e acriflavina reduzidas para 10 mg/L e 12,5 mg/L. Os antibióticos já vêm na fórmula: depois da esterilização, só é preciso adicionar o suplemento citrato de amônio férrico.
O produto acompanha certificado de qualidade, garantindo rastreabilidade e conformidade para uso laboratorial.
Acompanha:
| Característica | Especificação |
|---|---|
| Apresentação | Frasco com 500 g de meio desidratado |
| Aparência do meio desidratado | Pó fino de cor bege |
| Aparência do meio preparado | Âmbar |
| pH final | 7,2 ± 0,2 a 25 °C |
| Preparo | 28,7 g do meio em 500 mL de água destilada |
| Esterilização | Autoclave a 121 °C por 15 minutos |
| Suplemento | Citrato de amônio férrico, um frasco reconstituído em 5 mL, adicionado a 45–50 °C |
| Norma | Fórmula aderente à ISO 11290 |
| Sinônimos | Caldo Demi Fraser Base, Caldo Half Fraser, Caldo de Enriquecimento Listeria spp. |
| Registro ANVISA | Produto não passível de regulamentação |
| Fórmula (g/L) | |
| Cloreto de sódio | 20,00 |
| Hidrogenofosfato dissódico di-hidratado | 12,00 |
| Digestão enzimática de caseína | 5,00 |
| Extrato de carne | 5,00 |
| Extrato de levedura | 5,00 |
| Digestão enzimática de tecidos animais | 5,00 |
| Cloreto de lítio | 3,00 |
| Fosfato de potássio | 1,35 |
| Esculina | 1,00 |
| Cloridrato de acriflavina | 0,0125 |
| Ácido nalidíxico | 0,01 |
Modo de preparo:
Uso na detecção de Listeria:
Como o caldo funciona:
Listeria spp. pode estar presente em pequeno número e acompanhada de muitos outros micro-organismos, por isso o enriquecimento seletivo é necessário. A digestão enzimática de caseína, a digestão enzimática de tecidos animais e o extrato de carne fornecem nitrogênio, vitaminas, minerais e aminoácidos essenciais; o extrato de levedura é fonte de vitaminas do complexo B; os fosfatos agem como sistema tampão.
Todas as espécies de Listeria hidrolisam a esculina, que reage com os íons férricos e escurece o meio. A adição de citrato de amônio férrico melhora o crescimento de Listeria monocytogenes, e o cloreto de lítio inibe os enterococos, que também podem hidrolisar a esculina.
Segurança no manuseio:
Controle de qualidade (30 ± 1 °C, 25 ± 1 h):
| Micro-organismo | Especificação | Reação característica |
|---|---|---|
| Escherichia coli ATCC 25922 | Inibição total em TSA | — |
| Enterococcus faecalis ATCC 29212 | Menos de 100 colônias em TSA | — |
| Listeria monocytogenes ATCC 13932 + E. coli ATCC 25922 + E. faecalis ATCC 29212 | Mais de 10 colônias em ágar Listeria (Ottaviani e Agosti) | Colônias verde-azuladas com halo opaco |
Não. O ácido nalidíxico e a acriflavina já estão na fórmula. Depois da esterilização, a 45–50 °C, adicione apenas um frasco de suplemento citrato de amônio férrico reconstituído em 5 mL de água destilada estéril.
28,7 g em 500 mL de água destilada. Para o enriquecimento primário, a proporção é de 25 g ou 25 mL de amostra para 225 mL do caldo suplementado.
As espécies de Listeria hidrolisam a esculina, que reage com os íons férricos do suplemento e escurece o meio.
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